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體外診斷qPCR引物及探針

作為分子診斷qPCR試劑盒中的核心原料,引物及探針的質量對于樣本靶標檢測的準確性,qPCR引物及探針起到了極其關鍵的作用。而對于分子診斷的應用,需要對引物及探針的純度、熒光強度和潔凈度等一系列指標提出更高的要求。自以qPCR技術為基礎的分子診斷應用在國內外興起開始,生工生物即不斷對生產工藝進行優化升級。目前,我們生產的引物及探針,已被國內外大量的分子診斷試劑盒生產商采用。

在線訂購 在線引物設計

我們的優勢

  1.  專用于生產分子診斷應用產品的10萬級潔凈生產車間和實驗室,其中上海總部獲得獲得了ISO 13485和GMP認證;
  2.   專門經過優化的HPLC_CE (IVD)純化,在保證純度的前提下,避免外源性污染;
  3.  可選擇額外定制QC檢測:qPCR 探針熒光檢測、NTC檢測及關鍵指標批次間差異檢測;
  4.  建立周期性質量跟蹤體系并定期出具質量跟蹤報告。

訂購信息

IVD qPCR引物

IVD qPCR Primers

包含一對正反義鏈,常規情況下不帶修飾。IVD專用的 qPCR引物全部在符合醫藥診斷級的10萬級潔凈車間生產及純化,可選擇多種純化方式,推薦專門針對IVD優化的HPLC_CE (IVD)純化。

純化方式 堿基范圍 交付形態 包裝形式 額外QC 合成周期
HPLC_CE (IVD) 11~59 mer 干粉
液體
管裝
96孔板
384孔板
純度(CE) 3~5工作日

備注:

*HPLC_CE (IVD)為推薦純化方式,如需考慮成本,也可考慮ULTRAPAGE及標準HPLC純化方式,如對引物純度要求更高,則可選擇2X HPLC純化方式。選擇這些純化方式的引物均保證在符合醫藥診斷級的標準的10萬級潔凈車間內生產;

**如引物長度在堿基范圍之外,請在訂購前與技術支持進行咨詢溝通。

IVD qPCR探針

IVD qPCR Probe

通常為一條雙端分別修飾熒光和淬滅基團的單鏈DNA,其中也包含具有雙重淬滅保障的雙淬滅熒光探針。IVD專用的 qPCR引物全部在符合醫藥診斷級的10萬級潔凈車間生產及純化,推薦專門針對IVD優化的HPLC_CE (IVD)純化,可在保證純度的基礎上有效避免外源性污染。

探針修飾方式及基團說明請查看IVD qPCR探針修飾基團說明

純化方式 堿基范圍 交付形態 包裝形式 額外QC 合成周期
HPLC_CE (IVD) 11~40 mer 干粉
液體
管裝
96孔板
384孔板
純度(CE) ≤5工作日

備注:

*HPLC_CE (IVD)為推薦純化方式,如需考慮成本,也可考慮標準HPLC純化方式,如對引物純度要求更高,則可選擇2X HPLC。選擇這些純化方式的引物均保證按醫藥診斷級的標準在10萬級潔凈車間安排生產;

**如引物長度在堿基范圍之外,請在訂購前與技術支持進行咨詢溝通。

質量控制

除標準質檢外,針對于IVD qPCR應用的熒光探針,我們可以通過額外定制QC檢測來給予進一步的質量保證。

  熒光值酶切增量(FLU):確保TaqMan探針、分子信標等常規雙標記引物的熒光、淬滅基團功能完全正常。

酶切增量檢測案例

對照組由于不含DNase I,雙標記探針保持完整,熒光基團被淬滅,只檢測到本底熒光值195.1;酶切組中

由于含有DNase I,雙標記探針被水解,熒光基團脫離淬滅范圍,檢測到明顯的熒光增強,熒光值達到

11486.9,為本底熒光的58.9倍,符合客戶定制的質控標準。

  陽性模板對照檢測(PTC):保證陽性靶標的擴增效率。

PTC擴增檢測案例

配置陽性擴增體系,進行qPCR檢測,檢測擴增曲線、Ct值和熒光值;根據協議,一定濃度模板存在下,qPCR

實驗結果應出現合理的Ct值、熒光值以及標準的擴增曲線。不同批次的引物探針應表現出相近的實驗結果

  人源污染檢測(HSC):避免引物污染有人gDNA。

HSC擴增檢測案例

使用常規人源DNA對應的引物、探針,將待測Oligo作為模板,配制擴增體系,進行qPCR檢測,檢測擴增曲線

及對應Ct值。A:45個反應循環內擴增曲線呈平線,系統判斷無Ct值,則說明引物探針純凈,無人源模板污染;

B:45個循環內,擴增曲線出現翹起,系統判斷出Ct值,則說明引物探針有人源基因組DNA污染。

  無模板對照檢測(NTC):杜絕陰性對照出現假陽性。

NTC擴增檢測案例

將訂單中引物探針配制為qPCR體系,使用水作為模板,進行探針法qPCR反應,通過反應的擴增曲線及系統記錄Ct

值,判斷引物探針中是否有模板污染。A:若45個循環內,擴增曲線為平線,系統判斷無Ct值,則說明引物探針純

凈,無模板污染;B:若45個循環內,擴增曲線出現翹起,系統判斷出Ct值,則說明引物探針有模板污染。

資源

文檔下載
引物合成線下訂購表(128 KB) 引物定制合成手冊(1.84 MB)
工業產品手冊(7.17 MB) 引物使用說明書(1 MB)
修飾基團說明手冊(4 MB)

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收起列表

工具
引物在線設計 在線Oligo分析器
常見問題
引物純化方法選擇 引物在線訂購指南
引物質檢項目說明
產品促銷
2020年引物合成網購促銷 [2020-9-1]
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